Текст книги "Женское здоровье. Большая медицинская энциклопедия"
Автор книги: авторов Коллектив
Жанр:
Энциклопедии
сообщить о нарушении
Текущая страница: 84 (всего у книги 124 страниц)
Наличие у уреаплазмы фермента уреазы и способности выделять уреазу позволило использовать чувствительный тест(цветной тест) – расщепление мочевины (находится в составе питательной среды) на углекислый газ и аммиак; реакция среды меняется от кислой к щелочной, изменяя цвет индикатора (бромтимолового синего) от лимонно-желтого до зеленого, а при высокой концентрации – до синего. На основании изменения цвета эта реакция названа «цветной». Позже цветной тест был предложен для рутинных исследований клинических образцов. Рост уреаплазм в жидкой среде в течение 16–18 ч с изменением цвета ускоряет лабораторную диагностику микроба по сравнению с идентификацией колоний на плотных средах (5–7 дней) и исключает субъективизм при микроскопической диагностике. В результате роста уреаплазм происходит изменение среды от желтого к красному без помутнения среды и выпадения осадка. Сейчас широко используется среда U-9, в которой изменение цвета при росте уреаплазм начинается со дна с последующим распространением по всему объему пробирки. Данная среда может быть использована для количественной оценки уреаплазм в образцах мочи, уретральных экссудатах прямым титрованием.
При генитальном микоплазмозе исследуют срединную порцию утренней мочи, соскобы слизистой уретры, сводов влагалища, цервикального канала. При простатитах необходимо исследовать секрет простаты, а при мужском бесплодии – сперму. При заборе данного материала необходимо соблюдать основные санитарно-гигиенические правила.
Достоинством этого метода является абсолютная специфичность и возможность получения чистой культуры уреаплазм, необходимой для исследования ее чувствительности к наиболее широко используемым в клинике антибиотикам.
Широкое распространение в последние годы нашли тест-системы, позволяющие одновременно устанавливать наличие двух возбудителей микоплазмоза – уреаплазмы и микоплазмы – культуральным методом. Эти диагностикумы позволяют культивировать, идентифицировать и определять чувствительность к антибиотикам (дифференциально титровать) двух возбудителей. Высокое качество данных тест-систем, простота и удобство в постановке реакции явились предпосылкой широкого использования в практическом здравоохранении. Единственным недостатком этой культуральной методологии является их высокая стоимость.
...
После получения положительного результата, т. е. наличия микоплазм и уреаплазм с определенным титром, при использовании специального набора можно установить чувствительность микроорганизма к антибиотикам.
Тест-система фирмы «Бриорд»(Микоплазма «ДИО», Франция) при установлении наличия у пациента возбудителей и определении их титров (низкие – высокие) дает возможность установления их чувствительности к наиболее широко применяемым антибиотикам: моноциклину, тетрациклину, доксициклину, эритромицину, клиндомицину, пристомицину, джозамицину (вильпрофену) и офлаксоцину. Ход определения исследования подробно описан в инструкции, прилагаемой к набору данной тест-системы.
В настоящее время в России успешно разрабатываются диагностикумы для выявления антигенов микоплазм и уреаплазм в реакции иммунофлюоресценции. Диагностикумы предназначены для установления наличия возбудителей в мазках, соскобах, мазках-отпечатках из цервикального канала, уретры и влагалища.
Принцип действия этого метода основан на реакции антиген – антитело. Меченные флюороизотиоционатом (ФИТЦ) антитела против микоплазм специфически соединяются с антигенами микроорганизмов, находящимися в фиксированных образцах. При изучении образца в люминесцентном микроскопе микоплазмы выявляются в виде зеленого гранулярного свечения на мембранах эпителиальных клеток и в межклеточном пространстве. Исследуемый образец должен содержать как можно больше эпителиальных клеток, а также необходима тщательная стерилизация материала для устранения неспецифического свечения. В случае недостатка или отсутствия в клиническом материале эпителиальных клеток исследование необходимо повторить.
В мазке, окрашенном ФИТЦ, выявление интенсивного свечения рекомендуется не менее чем на четырех эпителиальных клетках. Отрицательный результат определяется в виде отсутствия специфического свечения в области мембран эпителиальных клеток, или наблюдается зеленовато-желтоватая аутофлюоресценция базальных мембран эпителиальных клеток. При попадании в материал большого количества слизи свечение будет не ярко-зеленым, а желтым или зеленовато-желтым.
Об оценке результатов, содержании набора, проведении реакции подробно указано в инструкциях по применению диагностикумов.
В настоящее время эти тест-системы официально зарегистрированы и используются в практике работы лабораторий. Несмотря на то что еще не накоплен значительный опыт работы с этими диагностикумами и микроскопические методики являются наиболее субъективными и сложными для воспроизводства, они могут быть использованы для скрининговой диагностики микоплазмоза.
Как и при установлении наличия других микроорганизмов, сложных для культивирования и микроскопии, при микоплазме используются ПЦР-анализ, ДНК-гибридизация, ИФАи некоторые другие методологии. В настоящее время в России зарегистрировано несколько тест-систем для ПЦР-анализа микоплазм, имеющих непосредственное отношение к урогенитальной патологии.
Все эти методологии по сравнению друг с другом имеют свои преимущества и недостатки: время проведения анализа, чувствительность, удобство в работе, стоимостные соображения и др. По степени значимости в зависимости от возможностей лабораторий их можно разделить на 2 группы:
1) скрининговые – реакция флюоресценции и подтверждающие – ПЦР-анализ;
2) культуральная диагностика.
Преимущества культуральной диагностики заключаются в возможности выявления живых возбудителей и установления их чувствительности к лекарственным препаратам. Данные методологии позволяют в большинстве случаев диагностировать наличие или отсутствие микоплазм и провести адекватное лечение.
Лечение
Лечение воспалительных заболеваний, вызванных микоплазмой, необходимо проводить комплексно с применением современных препаратов и физиотерапевтических процедур.
...
При назначении медикаментозного лечения учитываются индивидуальные особенности пациента, тяжесть заболевания и другие факторы.
С учетом такого подхода существует несколько вариантов лечения данного заболевания:
1. Применяются антибиотики тетрациклинового ряда и макролиды. Однако сроки их применения значительно меньше, чем при лечении хламидиоза. Доксициклина гидрохлорид и метациклин применяют в течение 5–6 дней, курсовая доза 1,2 и 4,8 г соответственно. При противопоказаниях в применении вышеназванных антибиотиков назначают морфоциклин внутривенно медленно в дозах: 150 мг через 12 ч в первый день, в последующие 4 дня по 150 мг один раз в день; продолжительность лечения 5 дней, курсовая доза 0,9 г. Из антибиотиков-аминогликозидов можно назначать гентамицин по 40 мг через каждые 8 ч в течение 5 дней внутримышечно.
2. Применяются современные антибактериальные препараты – представитель группы фторхинолона: ципробай по 500 мг 2 раза в день, на курс лечения 5,0 г; абактал по 400 мг 2 раза в день, курсовая доза 4,0 г; таривид – по 400 мг каждые 12 ч в течение 5 дней, на курс 4,0 г.
3. При сочетании микоплазменной (уреаплазменной) инфекции с трихомонозом лечение начинают с терапии трихомониаза (доза трихопола на курс лечения составляет 5,5 г). При сочетании с хламидиями проводят курс лечения, рассчитанный на подавление хламидийной инфекции. При сочетании микоплазменной и гонорейной инфекции проводят терапию с применением рифампицина и эритромицина.
Рифампицин назначают однократно по 0,9 г в первый день, по 0,15 г 3 раза в день на 2-й и 3-й день, по 0,15 г 2 раза в день на 4—7-й день, на курс лечения всего 3,0 г препарата. Одновременно с рифампицином назначают эритромицин по 0,5 г 4 раза в день (внутрь), на курс лечения 12,0 г. Целесообразно на фоне этого лечения внутримышечно вводить дезоксирибонуклеазу ежедневно однократно по 25 мг/сут в течение 6 дней.
Может наблюдаться сочетание трихомонадной, хламидийной и микоплазменной (уреаплазменной) инфекций. Тогда лечение проводят следующим образом. Начинают трихопол, курсовая доза 5,5 г на фоне диаминодифенилсульфонотерапии, принимая препарат по 0,1 г 2 раза в день первые 2 дня, затем по 0,05 г 2 раза в день 8 дней, на курс лечения 1,2 г. С 3-го дня лечения добавляют эрициклин по 0,5 г 4 раза в сутки, курс лечения – 16 дней.
По мнению многих врачей, при лечении беременных женщин можно использовать только эритромицин, который не дает угрозы осложнений для плода.
Трихомоноз (трихомониаз)
Трихомоноз среди нозологий, обобщенно именуемых заболеваниями, передающимися половым путем (ЗППП), занимает особое место. Трихомоноз – заболевание, вызванное проникновением простейших одноклеточных организмов, имеющее особенности в механизме развития и признаках заболевания, что, как правило, не учитывается при диагностике и реабилитации больных. Некоторые ученые считают, что мочеполовой трихомоноз, особенно хронический, большей частью вызван смешением простейших организмов и бактерий.
Возбудитель и распространенность заболевания
Trichomonas vaginalis – простейшее из класса жгутиковых, протозойный паразит, является причиной воспалительных заболеваний органов малого таза как мужчин, так и женщин. Урогенитальный трихомониаз по распространенности среди заболеваний, передающихся половым путем, занимает далеко не последнее место. У женщин наиболее часто этим паразитом инфицируется слизистая влагалища, у мужчин – мочеиспускательный канал, предстательная железа и семенные пузырьки.
По общероссийским данным (МЗ РФ), ежегодно заболевает более 300 человек на 100 тыс. населения, причем в ряде регионов (Саратовская и Липецкая области) эта цифра достигает более 430 и 500 на 100 тыс. населения соответственно.
По данным Всемирной организации здравоохранения (1999 г.), трихомонозом болеет около 10 % населения земного шара.
Урогенитальный трихомоноз является серьезной медико-социальной проблемой. Наряду с постоянным ростом заболеваемости выявляется тенденция изменения клинической картины этого заболевания, как у мужчин, так и у женщин. По данным ряда авторов, преобладание в настоящее время вялотекущих, бессимптомных форм трихомоноза, сложных для диагностики, связано с нарушением естественного экологического равновесия микроорганизмов, которые поддерживают гомеостаз, а это приводит к изменению биоценоза, снижению колонизационной резистентности слизистых, формированию сложных микробных ассоциаций.
Trichomonas vaginalis, открытая как влагалищный паразит в начале XX в. Альфредом Донне, обладает, несмотря на относительно небольшие размеры, сложным строением. Недостаточно изучен генетический аппарат жгутиконосцев, к которым кроме трихомонад относятся лямблии и трипаносомы, а также метаболизм простейших, которые являются гетеротрофными организмами с голозойным типом питания. Возможно, с этими особенностями связаны высокая изменчивость и полиморфность, затрудняющие диагностику, особенно методами микроскопии.
Проведены исследования взаимоотношений трихомонад in vitro (вне организма) с лактобактериями, эпителиальными клетками влагалища, лейкоцитами и эритроцитами, и сделан вывод о фагоцитарной активности «простейшего» в отношении всех перечисленных клеток. Непосредственно в материале от больных на субмикроскопическом уровне была продемонстрирована возможность фагоцитирования трихомонадой гонококка (Яшкова Г. Н., 1977).
...
Одним из механизмов развития заболевания является фагоцитоз трихомонады.
Есть указания и на эндоосмотический способ питания, при котором трихомонады выделяют во внешнюю среду фермент гиалуронидазу, это приводит к разрыхлению тканей и более свободному проникновению в межклеточное пространство токсических продуктов обмена, как самого простейшего, так и сопутствующей флоры.
В результате многолетних исследований зарубежных и отечественных авторов стала известна ультраструктура и метаболизм трихомонады – своеобразного неклеточного организма. В чистой культуре трихомонада имеет величину клетки в длину – 10 мкм, в ширину – 6 мкм, овальную или округлую форму. Хотя размеры ее могут меняться в зависимости от стадии заболевания, темпов роста, особенностей штамма. Имеются сведения о большей величине трихомонад, выделенных у женщин, по сравнению с выделенными у мужчин. Считают, что мелкие особи присущи острой стадии заболевания, а более крупные – хронической. В зависимости от фазы роста и физико-химических факторов среды меняется фенотип клетки. Трихомонада в организме хозяина может быть амебовидной формы с множественными псевдоподиями, которые копируют контур эпителиальной клетки. Все эти факторы говорят о существенной модификационной изменчивости трихомонад, выполняющей адаптационную функцию.
Форма клеток трихомонады была в центре внимания исследователей на протяжении многих лет, так как при рутинной диагностике – микроскопии нативных (влажных) и окрашенных мазков – этот параметр является важнейшим. Эта проблема заключалась в низкой разрешающей способности световой микроскопии и квалификации исследователя. Сейчас благодаря применению электронно-микроскопического исследования доказано, что трихомонада и в культуре, и в материале от больных может существовать одновременно в трех морфологических формах: грушевидной жгутиковой, амебовидной и круглой. Переход трихомонады из одного фенотипа в другой сопровождается одновременной изменчивостью внутреннего строения.
1. Амебовидные трихомонады имеют фагоцитарную активность, это обеспечивает им активизацию питания и запасания необходимых для размножения веществ; при этом выявлена выраженная цитотоксичность по отношению к клеткам хозяина.
2. Круглые трихомонады рассматриваются как почкующиеся или делящиеся особи.
Трихомонада имеет пять жгутиков (их длина почти равна длине самой трихомонады), четыре из которых расположены в ее передней части, а пятый – внутри ундулирующей мембраны, которые являются органами движения и адгезии. Трихомонады при неблагоприятных условиях существования трансформируются в овальную форму, это служило основанием считать, что они склонны к образованию цист. Впоследствии было доказано, что это не соответствует действительности, так как «клеточная стенка» трихомонад представлена лишь одной трехслойной (двухконтурной) цитоплазматической мембраной, на поверхности которой визуализируется рыхлый слой, состоящий главным образом из мукополисахарида(гликозаминогликана).
У трихомонад обнаружены внутриклеточные опорные структуры: коста, к которой прикрепляется ундулирующая мембрана(тянется вдоль клетки), и аксостиль, крупный органоид клетки гиалинового состава, напоминающий стержень, проходящий через всю трихомонаду и заканчивающийся снаружи в виде острого хвоста.
В цитоплазме живых трихомонад находятся гранулы – гидрогеносомы, которые являются аналогами митохондрий, содержат ферменты и участвуют в реализации метаболизма клетки. В цитоплазме трихомонады также находятся лизосомоподобные структуры – фагосомы. Ядро трихомонады расположено ближе к тому концу клетки, на котором расположены четыре жгутика (в передней части клетки), и окружено оно, как у эукариот, двухслойной ядерной мембраной.
Установлено, что трихомонады размножаются путем деления, обладают подвижностью благодаря жгутикам и ундулирующей мембране, а также оптимальным условиям развития (рН среды 5,9–6,5, температура 35–37 °C). Хорошо известно, что трихомонады быстро погибают в гипертонических и дезинфицирующих растворах, при температуре выше 40 °C, при высушивании.
...
Они могут сосуществовать с вирусом простого герпеса, с гонококками, хламидиями и другими микробами, содержащимися в нижних отделах половых органов.
В 1987 г. при изучении влагалищных трихомонад (L. Fold и соавт.) обнаружили у них специфические рецепторы эстрадиола и дигидро-тестостерона, наиболее высокий уровень рецепторов эстрадиола обнаружен у трихомонад, чувствительных к метронидазолу. Рецепторы эстрогенов блокировал тамоксифен, активный антиэстроген, поэтому некоторые исследователи пришли к выводу, что эти данные позволят использовать гормональные препараты и антигормоны в лечении трихомоноза. В эксперименте in vitro было установлено, что трихомонады в той или иной мере снижают подвижность сперматозоидов и их жизнеспособность. Так же действуют трихомонады на сперму во влагалище. Этим объясняется снижение плодовитости мужчин и женщин, больных трихомонозом.
Путь передачи и механизм развития заболевания
На сегодняшний день точно установлено, что мочеполовой трихомоноз передается главным образом половым путем. Внеполовое заражение наблюдается редко, например во время продвижения плода через родовые пути, пораженные трихомонадами.
Предположение о патогенности кишечной и ротовой трихомонад оказалось необоснованным, так как при попадании их в урогенитальный тракт они гибнут, не вызывая воспалительных процессов.
В редких случаях возможно бытовое заражение, например через влажные полотенца и мочалки, так как трихомонада выживает во влажной, теплой среде по нескольку часов. По мнению многих авторов, большинство случаев трихомониаза с неполовым путем передачи являются поздно выявленной хронической инфекцией.
Трихомонада является строго облигатным паразитом человека, и в естественных условиях урогенитальный трихомоноз не встречается, а заражение экспериментальных животных влагалищной трихомонадой вызывало неспецифические воспалительные явления.
Урогенитальный трихомонозне включен в перечень венерических болезней, предусмотренных международной классификацией, но мочеполовой трихомоноз иногда считается венерическим заболеванием.
При влагалищном трихомонозепроисходит сдвиг рН влагалищного содержимого в сторону щелочной реакции, это в значительной мере препятствует жизнедеятельности нормальной микрофлоры и приводит к усиленному росту анаэробных (паразитов) бактерий. При смещении рН в щелочную сторону увеличивается активность гидролитических и протеолитических ферментов, также снижается уровень ионизированного кальция (Са), что, в свою очередь, ведет к нарушению межклеточных взаимоотношений в глубоких слоях эпителия влагалища. С биологической точки зрения происходят конкурентные метаболические взаимоотношения между нормальной и патологической микрофлорой.
Иммунологические аспекты микроэкосистемы при трихомонозе практически не изучены, несмотря на многочисленные исследования. Известно, что простейшие, с одной стороны, способны сохранять жизнедеятельность, с другой – выявляемые антитела у больных, переболевших трихомонозом, являются лишь маркерами существующей или принесенной инвазии и не способны обеспечить защиту организма от повторного заражения. Доказано, что мочеполовой трихомонозсопровождается некоторыми иммунологическими реакциями (образование специфических антител, положительная РСК и др.), но иммунитет к данному возбудителю не развивается.
В то же время существует мнение об иммунологическом механизме невосприимчивости при трихомонозе.
Клиническому течению трихомоноза способствуют общие заболевания, эндокринные расстройства, нарушения обмена веществ, гиповитаминоз, нарушение функции яичников, хронический сальпингоофрит, изменения в слизистой оболочке влагалища. Известно, что бактериальное загрязнение влагалища нередко приводит к снижению кислотности его содержимого. Изменение кислотности содержимого влагалища наблюдается также во время и после менструации, именно в это время трихомонады интенсивно размножаются. III и IV степени чистоты влагалищной флоры (при II степени наблюдается редко) сопутствуют трихомонадному кольпиту.
Установлено, что при определенных условиях трихомонады не вызывают ответной реакции со стороны организма хозяина или провоцируют развитие слабосимптомных проявлений. Таким образом, возникает своеобразное динамическое равновесие, которое под влиянием тех или иных факторов может сдвигаться в сторону развития заболевания или выведения возбудителя из организма.
В настоящее время установлено, что мочеполовой трихомоноз в большинстве случаев является многоочаговой инвазией. Так, кольпиту нередко сопутствуют уретрит, цервицит и другие заболевания. Основным местом паразитирования простейших является слизистая оболочка влагалища, обычно поражается и эктоцервикс, однако трихомонады могут внедряться в скеиновы ходы, выводные протоки больших желез преддверия, в уретру, а также мочевой пузырь. Имеются данные о проникновении трихомонад в полость матки и даже маточных труб.
Воспалительный процесс при трихомонозе развивается в области пораженных слизистых оболочек: возникают покраснение, отечность, экссудация, повреждение эпителиальных клеток. Впоследствии могут возникнуть мелкие кровоизлияния и изъязвления. При несвоевременном и неадекватном лечении воспалительная реакция может распространиться на поверхностный слой мышечной оболочки, прилегающий к пораженной слизистой оболочке влагалища. Также развитию воспалительного процесса сопутствует образование грануляционной ткани.
Воспалительная реакция в мочеполовых путях находится в прямой зависимости от наличия большого количества паразитов.
Инкубационный период
Инкубационный период составляет 5—15 дней, иногда больше, в зависимости от индивидуальных особенностей организма и ряда других причин.
Признаки заболевания
Клиническое течение урогенитального трихомоноза характеризуется длительностью, если своевременно не проведено адекватное лечение.
С учетом продолжительности заболевания трихомонозом и его симптомов различают (Летучих А. А., 1985) следующие его формы:
1) острую, подострую и торпидную (малосимптомную) формы – свежий трихомоноз;
2) хронический трихомоноз – характерны торпидное течение и давность заболевания более 2 месяцев;
3) трихомонадоносительство – отсутствие симптомов при наличии трихомонад в содержимом влагалища.
Трихомонада у мужчин поражает уретру, предстательную железу, семенные пузырьки, куперовы железы, мочевой пузырь и почечные лоханки.
Среди заболеваний у мужчин, причина возникновения которых связана с урогенитальным трихомонозом, называют простатит, уретрит, эпидидимит и др. В 50–75 % случаев заболевание трихомониазом у них протекает бессимптомно. Часто возникает трихомонадоносительство. При трихомониазе у мужчин возникают следующие симптомы: выделения из мочеиспускательного канала, боль и жжение при мочеиспускании, при поражении предстательной железы – симптомы простатита.
Осложнения у мужчин при трихомонадных уретритах появляются чаще, чем при гонорее, – это циститы, пиелиты, пиелонефриты.
...
У женщин признаки трихомоноза выражены ярче, чем у мужчин, хотя нередко встречаются и бессимптомные формы.
Отмечается, что урогенитальный трихомоноз поражает преддверие влагалища и само влагалище, придатки яичников, маточные трубы, матку.
При острой и подострой формах заболевания женщины жалуются на обильные бели, жжение и зуд в области наружных половых органов. Нередко отмечаются ощущения тяжести в нижних отделах живота, нарушение сна (при выраженном зуде). При уретритах появляются жжение и болезненность во время мочеиспусканий.
В клинической картине заболевания преобладают явления кольпита и вагинита.
Острый процесс сопровождается дизурией, раздражением стенок влагалища, появлением обильных жидких, пенящихся, гноевидных выделений желто-зеленого цвета с неприятным запахом. Эти выделения покрывают стенки влагалища и скапливаются в заднем своде. Слизистая оболочка влагалища и влагалищной части шейки матки зачастую гиперемирована и отечна. Иногда образуется эрозия, затем превращающаяся в псевдоэрозию шейки матки. В большинстве случаев такие патологические процессы возникают в результате поражения слизистой оболочки трихомонадами и сопутствующей патогенной микрофлорой. При обследовании больной с помощью кольпоскопа на слизистой оболочке влагалища и влагалищной части шейки матки обнаруживаются точечные кровоизлияния, яснее становятся признаки эрозии или псевдоэрозии.
При малосимптомной форме жалобы на бели, зуд и другие проявления заболевания не выражены или отсутствуют. Нормальную окраску имеет слизистая оболочка влагалища и шейки матки. Только при кольпоскопии выявляются стертые признаки воспалительного процесса (нередко выраженная очаговая или диффузная гиперемия, петехии).
Хронический урогенитальный трихомоноз характеризуется длительным, вялым течением и рецидивами заболевания. Возникновению рецидивов способствуют нарушения половой гигиены, отсутствие соответствующего лечения партнера, снижение эндокринной функции яичников, экстрагенитальные (внеполовые) заболевания, снижающие сопротивляемость организма к инфекции. При хроническом трихомониазе пациенты жалуются на небольшие выделения, иногда зуд в области вульвы. Признаки воспалительного процесса при урогенитальном трихомонозе выявляются в основном при кольпоскопии, так как они мало выражены (очаговые расширения капилляров, диффузная гиперемия).
При рецидиве появляются симптомы, характерные для острого генитального трихомоноза.
При цервиците часто отмечается гиперемия, распространяющаяся на слизистую оболочку влагалищной части шейки (особенно вокруг наружного зева). При обследовании больной наблюдаются слизисто-гноевидные выделения из канала шейки матки. Урогенитальный трихомоноз характеризуется затяжным течением и склонностью к рецидивам.
Диагностика
Установлению диагноза трихомоноза помогают анамнез (уретрит у мужа, длительность заболевания, рецидивы и др.) и данные объективного исследования. При кольпоскопическом исследовании учитывают изменения слизистой оболочки влагалища, шейки матки, уретры, выводных протоков больших вестибулярных желез. Так как специфические клинические проявления мочеполового трихомоноза отсутствуют, установление диагноза во многом зависит от результатов лабораторных методов исследования, к которым относятся: микроскопические, культуральные, серологические и молекулярно-биологические.
Микроскопическое исследованиеявляется наиболее распространенным и широко применяемым на практике. Хотя микроскопия недостаточно чувствительна и воспроизводима, субъективна и требует высокой квалификации исполнителя. Принцип этого метода основан на обнаружении возбудителя в нативных или окрашенных мазках: метиленовым синим, по Романовскому – Гимзе, по Грамму, бриллиантовым зеленым, по Лейшману – Романовскому и др.
При исследовании нативного препарата важно помнить, что исследовать необходимо свежевзятый материал – отделяемое уретры, простатический секрет, влагалищное отделяемое, отделяемое канала шейки матки, поверхности эрозий и других возможных очагов инвазии трихомонад. Больные за 5–7 дней до исследования не должны принимать противотрихомонадные средства (не проводят и местные процедуры). Материал берут пипеткой с резиновым баллончиком или металлической петлей. Изучение нативного препарата в микроскопе с темнопольным конденсером дает стабильные результаты, так как при этом обнаруживаются единичные и малоподвижные особи в скоплениях клеточных элементов за счет визуализации движения жгутиков. При исследовании препарата на предметное стекло наносят каплю патологического материала, смешанного с теплым физиологическим раствором хлорида натрия, накрывают покровным стеклом и немедленно исследуют в микроскопе, объектив 40, окуляр 7 или 10. При микроскопическом исследовании трихомонад в нативном препарате для них характерна грушевидная, округлая или овальная форма клетки, наличие жгутиков, толчкообразные движения ундулирующей мембраны и жгутиков простейших. Трихомонады в нативном образце, особенно в моче, можно по ошибке принять за семейство жгутиковых бодонидов. Необходимо знать, что бодониды обладают меньшим размером по сравнению с трихомонадами и лишь двумя жгутиками, что обусловливает их быстрое движение по прямой.
При окраске препарата метиленовым синим или бриллиантовым зеленым одновременно можно обнаружить наличие гонококка, а также кокко-бациллярной и другой флоры. При рассмотрении препаратов, окрашенных метиленовым синим, наблюдаются трихомонады различной формы, контуры хорошо выражены, ядро, расположенное, как правило, эксцентрично, – овальное или вытянутое, окрашено интенсивнее, чем «нежная» сетчатая (ячеистая) цитоплазма.
К ошибкам при распознавании трихомонад, окрашенных синькой, следует отнести принятие за трихомонады эпителиальных клеток и макрофагов, часто присутствующих в мазке. За влагалищную трихомонаду может быть принята эпителиальная клетка с несколько эксцентричным ядром и нежной ячеистой цитоплазмой, сходной с ней по размеру и форме. Это же относится и к макрофагам. Ход исследования окрашенных препаратов метиленовой синькой заключается в следующем: материал от пациента наносят тонким равномерным слоем на чистые обезжиренные предметные стекла, высушивают на воздухе, затем препарат фиксируют 3 мин 96 %-ным этиловым спиртом или смесью Никифорова (спирт + эфир), высушивают, наносят 1 %-ный раствор метиленового синего на 1 мин, тщательно смывают оставшийся краситель под струей холодной воды и высушивают в штативе. Метод исследования мазков, окрашенных метиленовым синим или бриллиантовым зеленым, является отборочным, ориентировочным, а затем следует «специфическое» микроскопирование по способу Грамма или другими красителями. Такому микроскопированию обычно подвергаются «подозрительные» локализации: у женщин – цервикс, уретра, вагина, ректум, у мужчин – уретра, ректум. Обнаружение влагалищных трихомонад осуществляется с помощью исследования мазков, окрашенных различными способами, наиболее распространенным из всех является окраска по Грамму.
При правильной окраске препараты на тонких участках оранжево-фиолетового цвета, на более толстых – лилово-фиолетового. Ядра клеточных элементов (лейкоцитов, эпителиальных клеток и др.) частично удерживают основную фиолетовую окраску, т. е. в центре они окрашены в фиолетовый цвет, по периферии – в оранжево-красный. Цитоплазма трихомонад окрашивается в розовый цвет, а ядра их сохраняют фиолетовую окраску. Одновременно с простейшими исследуется микрофлора.
Для выявления особенностей тонкого строения влагалищных трихомонад применяют более сложные методы окраски препаратов: по Лейшману – Романовскому, Романовскому – Гимзе, – позволяющие в ряде случаев выявить жгутики, ундулирующую мембрану и аксостиль. Препарат окрашивается 5 %-ным раствором азур-эозина в дистиллированной воде в течение 1 ч.
