Текст книги "Акониты [фармакология, токсикология и применение]"
Автор книги: Абдулхай Алдашев
сообщить о нарушении
Текущая страница: 4 (всего у книги 12 страниц)
7. Симптомы отравления крыс клубнями аконитов Фишера, байкальского и таласского очень сходны, они выражаются в обильном слюнотечении, потении животного, параличе скелетной мускулатуры; иногда появляются также икотно-рвотные движения.
8. Аконит таласский, с точки зрения ветеринарной токсикологии, не опасен для животных, во-первых, потому, что сан растение почти неядовито, во-вторых, животные на воле едят его в незначительном количестве.
2. Токсичность сумм аконитовых алкалоидов
Предсказать безошибочно степень ядовитости или фармакологической активности того или иного вида растений, не имея сведений о содержащихся в них ядовитых веществах, не всегда возможно. Во многих растениях, в том числе в аконитах, ядовитые свойства обусловлены содержащимися в них алкалоидами. Поэтому большой научный и практический интерес представляют экспериментальные исследования по выяснении фармакологических и токсикологических свойств этих алкалоидов в их природном комплексе. Такие исследования особенно необходимы для ветеринарной фармакологии и токсикологии, так как по словам И. А. Гусынина (1958) «...лечебное действие растения в организме животного будет тем совершеннее, чем полнее будут сохранены природные сочетания действующих веществ, в которых они участвовали в обмене веществ при жизни растения. Разрушив природный комплекс, мы... совсем устраняем возможность проявления какого-либо действия, что не всегда отвечает целям». Это в полной мере можно отнести к фармакологическому и токсикологическому действию различных видов аконита. Тем более, что животные в ее естественных условиях отравляются не индивидуальными веществами растений, а комплексом ядовитых начал.
Исследования, посвященные токсикологии комплексов активных веществ аконитов, в известной нам литературе не описываются. Исходя из этого, мы приступили к изучению токсичности сумм алкалоидов из тяньшаньских видов аконитов джунгарского, каракольского, киргизского, таласского и лесного, выделенных С. Ю. Юнусовым и его учениками, а также из полтавского аконита дубравного (A. nemorosum М. В.). По нашей просьбе сумма алкалоидов из последнего была выделена Т. Ф. Платоновой в лаборатории алкалоидов ВИЛАРа, а из надземной части аконита киргизского нами получена хлороформная фракция алкалоидов по известной в химии методике.
Суммы алкалоидов испытывались на 740 белых крысах обоего пола в возрасте 3—4 месяцев. Всего было поставлено 80 опытов.
Методика исследования. Препараты перед испытанием подкислялись 1%-ным раствором соляной кислоты, затем растворялись в дистиллированной воде и нейтрализовались добавлением гидрокарбоната натрия, после чего металлическим зондом вводились животным через пищевод в желудок в концентрациях 1 1000. Наблюдения за подопытными животными и учет эффективности проводились по методике, известной из предыдущих экспериментов.
Результаты исследования. Сумма алкалоидов аконита таласского (СААТ) испытывалась в 14 опытах па 140 крысах. После введения животным препарата в дозах 100—300 мг/кг видимых изменений в их поведении не было. Начиная с доз 400 мг/кг стали появляться признаки отравления. Через 10—15 минут после введения препарата у крыс отмечалась вялость, увлажнялась морда, у некоторых животных слюна вытекала каплями, они сильно потели. Дыхание становилось затрудненным и редким. По мере увеличения дозы вещества картина отравления развивалась более интенсивно. К вышеописанным симптомам прибавлялось нарушение координации движении. При попытке передвигаться задние конечности скользили по полу Появившаяся в начале отравления мышечная дрожь сменялась параличом.
Первые случаи смерти животных отмечались после введения суммы алкалоидов аконита таласского в дозе 450 мг/кг, а от дозы 750 мг/кг погибло 6 из 10 подопытных крыс. Все подопытные животные погибли после получения 900 мг/кг препарата. Симптомы смертельного отравления крыс такие же, что и при отравлении клубнями. В табл. 6 приводятся различные деятельные дозы вещества для крыс.
Наибольшей переносимой дозой СААТ оказалось 300 мг/кг, наименьшей токсической – 400 мг/кг, наименьшей смертельной – 450 мг/кг, LD50 – 782,5 мг/кг, LD100 – 900 мг/кг.
Токсичность суммы алкалоидов аконита лесного (СААЛ) в 18 опытах проверялась на 180 крысах. Принципиального отличия в действии этого препарата на животных от СААТ отмечено не было. Деятельные дозы испытуемой суммы в основном совпадали с дозами предыдущего препарата. Не повторяя описания сходных симптомов, ограничимся приведением данных статистической обработки опытов. Наибольшая переносимая доза СААЛ для крыс равна 350 мг/кг, наименьшая токсическая – 400 мг/кг, наименьшая смертельная – 500 мг/кг, LD50 – 717,5 мг/кг, LD100 – 1600 мг/кг.
Почти тождественными с данными предыдущих препаратов оказались результаты опытов на 130 крысах по определен нию токсичности суммы алкалоидов аконита дубравного (СААДб) Сходство действия препарата наблюдалось во вес случаях. Наибольшая переносимая доза данного препарат для крыс равна 300 мг/кг, наименьшая токсическая 400 мг/кг, наименьшая смертельная – 450 мг/кг, LD50 – 767,5 мг/кг, LD100 – 1000 мг/кг.
Таблица 6
Результаты опытов по изучению токсичности суммы алкалоидов аконита таласского (СААТ) на крысах (1961 г.)
Опыты с суммами алкалоидов аконитов таласского (СААТ), лесного (СААЛ) и дубравного (СААДб) показывают их биологическую тождественность и малую токсичность для животных.
Что касается очищенных сумм алкалоидов остальных трех видов аконита (джунгарского, каракольского и киргизского), то их биологическая активность принципиально отличается от предыдущих препаратов. Они оказались несравненно токсичнее.
Сумма алкалоидов аконита джунгарского (СААД), испытанная на 160 крысах в 10 опытах, вызывала следующие симптомы отравления. В дозах 0,1—0,3 мг/кг она не оказывала токсического действия на животных. Незначительное повышение дозы (0,5 мг/кг) уже вызывало заметное изменение в поведении крыс. Через 5—10 минут после введения они стали бегать по полу, часто потирали лапками морду, у некоторых она стала мокрой. После непродолжительной активизации движений крысы, собравшись в кучу, дремали в течение 20—35 минут. По истечении этого срока подопытные животные внешне не отличались от контрольных.
Более отчетливые симптомы отравления отмечались при введении животным препарата в дозах 1—2 мг/кг. Кроме описанных признаков появлялись стоны при вдохе, дыхание становилось редким, глубоким, крысы дрожали, сильно потели, при ходьбе шатались, периодически наблюдались икотно-рвотные движения. При даче препарата в дозе 3 мг/кг отмечались случаи смерти животных от остановки дыхания после двух—трех тетанических судорог с явлениями опистотонуса. Сердце еще продолжало сокращаться 2—5 минут Возбудимость остановившегося сердца на механическое раздражение сохранялась, при дотрагивании до него кончиком пинцета оно отвечало одиночным сокращением.
Препарат СААД вызывал смерть у всех подопытных животных при дозе 20 мг/кг (табл. 7) Для данного препарата установлена наибольшая переносимая доза 0,3 мг/кг, наименьшая токсическая – 0,5 мг/кг, наименьшая смертельная– 3 мг/кг, LD50 – 7,25 мг/кг, LD100 – 20 мг/кг.
Таблица 7
Результаты по изучению токсичности алкалоидов аконита джунгарского (СААД) на крысах (1961 г.)
Аналогичные симптомы отравления животных наблюдались в опытах с суммами алкалоидов аконита каракольского (СААК) и киргизского (СААН), разница заключалась лишь в количестве токсических доз веществ. Наиболее токсичным оказался препарат СААК (табл. 8) В опытах на 100 крысах установлено, что его наибольшая переносимая доза 0,3 мг/кг наименьшая токсическая – 0,4 мг/кг, наименьшая смертельная 2 мг/кг, LD50 – 5,85 мг/кг, LD100 – 15 мг/кг.
Таблица 8
Результаты опытов по изучению токсичности суммы алкалоидов аконита каракольского (СААК) на крысах
Сумма алкалоидов нового аконита (СААН) по своей токсичности занимала последнее место из трех веществ. Ее активность изучалась на 90 крысах. Препарат СААН в дозе 1—2 мг/кг не вызывал заметных изменений в поведении подопытных животных. Характерные признаки отравления начали появляться после дачи крысам препарата в дозах 3—5 мг/кг. Случаи смертельного отравления отмечены после приема животными СААН в дозе 10 мг/кг. В табл. 9 приводятся результаты опытов с препаратом СААН. Для препарата СААН установлены следующие данные: наибольшая переносимая доза – 2 мг/кг, наименьшая токсическая – 3 мг/кг, наименьшая смертельная – 10 мг/кг, LD50 – 15,2 мг/кг, LD100 – 25 мг/кг.
Таблица 9
Результаты опытов по изучению токсичности суммы алкалоидов аконита киргизского (СААН) на крысах (1962 г.)
Сравнительная токсичность испытанных алкалоидов приведена в табл. 10.
Таблица 10
Сравнительная токсичность сумм аконитовых алкалоидов, установленная на крысах при пероральном введении
Таким образом, опыты с суммами алкалоидов различных видов аконита показывают, что они обладают качественно различной биологической активностью. Наиболее токсичными оказались алкалоиды аконита каракольского и джунгарского; за ними следуют алкалоиды аконита киргизского, обнаруженного нами на высокогорных пастбищах Чаткала. Клинические симптомы отравленных крыс алкалоидами названных трех видов аналогичны. В данных опытах, как и в экспериментах с клубнями аконитов джунгарского и каракольского, у отравленных животных характерными симптомами являются беспокойство, саливация, икотно-рвотные движения, замедленное глубокое дыхание, приступы тетанических судорог и прострация между приступами. Смерть животных наступает, как правило, от остановки дыхания. Продолжительность жизни у отравленных крыс смертельными дозами алкалоидов аконита джунгарского и каракольского сравнительно короткая. Они погибают обычно в течение первого дня отравления, но если переживут первые сутки, то в дальнейшем, как правило, выздоравливают.
Алкалоиды аконита киргизского в этом отношении имеют некоторую особенность. Вызывая у животных те же симптомы отравления, что и алкалоиды джунгарского и каракольского аконитов, они способны убить животное спустя 5—6 суток после их перорального введения.
Биологическая активность препаратов СААТ, СААЛ и СААДб в 50—200 раз слабее, чем СААК, СААД и СААН. Существенное различие отмечается и в симптомах отравления Под влиянием СААТ, СААЛ и СААДб у отравленных животных в качестве характерных признаков выступают угнетение общего состояния, нарушение координации движения, сильное потоотделение гиперсаливация, редкое глубокое дыхание с участием всех брюшных мышц; вначале дрожание, а затем паралич всей скелетной мускулатуры. На этом фоне смерть наступает от асфиксии.
Отравление как клубнями аконита таласского, так и суммами названных алкалоидов протекает остро и заканчивается в течение 24 часов в зависимости от доз выздоровлением, либо смертельным исходом.
Действующими токсическими веществами в аконитах каракольском и джунгарском являются активные алкалоиды (аконитин и ему подобные), а в аконитах таласском, лесном и дубравном – мало активные (типа атизина).
Результаты наших опытов подтверждают литературные данные свидетельствующие о содержании в двух первых аконитах ядовитого алкалоида аконитина и ему подобных дитерпеновых производных, а в трех последних – мало активных алкалоидов типа атизина.
3. Изучение токсичности индивидуальных аконитовых алкалоидов
Симптомы и патогенез отравления животных ядовитыми растениями, глубина патологических процессов и ряд других токсикодинамических факторов зависят, главным образом, от физико-химической и биологической активности основного действующего вещества. В предыдущей серии опытов нами установлено, что токсическими началами в аконитах являются их алкалоиды. Следовательно, степень токсичности различных видов аконита на животных обусловливается химическое природой и биологической активностью алкалоидов. Но в аконитах содержится значительное число алкалоидов, состоящих из различных химических групп, биологическая активность большинства из которых еще не изучена. Между тем, для дифференциальной диагностики отравления важно знать особенности токсикодинамики отдельных аконитовых алкалоидов.
Поэтому нами испытаны на лабораторных животных следующие аконитовые алкалоиды: аконитин, лаппаконитин, зонгорин, талатизамнн, делаваконитин и анхвэйаконитии.
При выборе индивидуальных веществ автор руководствовался как индуктивным, так и дедуктивным методами. Первый позволяет на основе опытов с индивидуальными веществами предположить их содержание в изучаемых растениях, второй поможет подобрать для опытов именно те алкалоиды, которые должны содержаться в исследуемых видах аконита.
Активность алкалоидов изучалась на 532 белых крысах-самцах в возрасте трех месяцев весом 80—130 г. Всего было поставлено 60 опытов.
Методика исследования. Для каждой серии опытов подбирались крысы строго определенного веса, каждая доза алкалоидов испытывалась на 6—10 животных. Некоторые опыты проводились на белых мышах. Алкалоиды вводились крысам внутрь в форме водного раствора в количестве 1—1,5 мл. Бромгидрат аконитина был получен из ВНИХФИ, сульфат эангорина и лаппаконитин – основание – из лаборатории алкалоидов ВИЛАР, а талатизамин – основание – из Института химии растительных веществ АН Узбекской ССР. Анхвэйаконитин и делаваконитин являются импортными алкалоидами. Алкалоиды-основания перед испытанием переводились в хлоргидрат и нейтрализовались гидрокарбонатом натрия. Непрерывное наблюдение за отравленными животными велось в течение 8 часов, а затем проводился ежедневный осмотр еще в течение последующих 9 дней.
Результаты исследования. Токсичность бромгидрата аконитина изучалась в 12 опытах на 120 крысах. В дозах 0,1—0,2—0,3 мг/кг он не вызывал у крыс видимых изменений. После введения препарата в дозе 0,4 мг/кг наблюдались скоропроходящие явления токсикоза, через 3—5 минут повышалась двигательная активность животных, затем спустя 10—15 минут крысы дремали в течение 20—30 минут. В дозе 0,75 мг/кг указанные симптомы выступали более отчетливо и держались в течение 1,5—2 часов. При этом появлялись слюнотечение, беспрерывные жевательные движения.
Аконитин в дозе 1 мг/кг вызывал тяжелое отравление животных. Крысы потели, дрожали, наблюдалась обильная саливация, скованность движений, часто повторяющиеся икотно-рвотные движения. Дыхание животных становилось глубоким, затрудненным. Через 3—4 часа эти симптомы исчезали и по внешнему виду подопытных животных нельзя было отличить от контрольных. При дальнейшем наблюдении в течении 9 дней видимых отклонений не отмечалось. При вскрытии убитых животных макроскопических изменении во внутренних органах не было. Аконитин, начиная с доз 2 мг/кг и выше, вызывал смертельное отравление животных. В наших опытах не было ни одного случая, чтобы животное, оставшееся в живых от смертельных доз бромгидрата аконитина в течение первых суток, погибало на протяжении последующих девяти суток наблюдения (табл. 11).
Таблица 11
Результаты опытов по изучению токсичности аконитина на крысах(1961 г.)
* Животное пало от попадания препарата в легкие.
На основании результатов опытов наибольшей переносимой дозой аконитина при его введении внутрь можно считать 0,3 мг/кг, наименьшей токсической – 0,4 мг/кг. Доза бромгидрата аконитина в 2 мг/кг для крыс является наименьшей смертельной, LD50 равна 5,97 мг/кг, а абсолютно смертельная доза (LD100) – 10 мг/кг.
Токсичность зонгорина испытывалась на 80 крысах. Всего было поставлено 8 опытов. Препарат в дозе 5 мг/кг не вызывал видимых изменений в поведении животных. Первые признаки отравления животных от алкалоида наблюдались при дозе 10 мг/кг. Симптомы отравления были сходны с симптомами отравления от аконитина. Доза препарата в 20 мг/кг оказалась смертельной для части животных (4 из 10). Как правило, смерть наступала в течение первых 30 минут. Если животные переживали первые сутки после смертельного отравления, то они оставались живыми в течение последующих девяти суток. Повышение дозы зонгорина не повлияло на средний срок гибели отравленных животных. Более ярко проявлялся симптомокомплекс токсикоза у тех крыс, которые прожили около 20 часов после отравления. У них отмечалась атаксия, дряблость скелетной мускулатуры, дыхание становилось редким (2—3 вдоха в минуту), бесшерстные участки кожи имели синюшный оттенок. При дотрагивании напрягались мышцы, в том числе и конечности, отмечался дорзальный изгиб позвоночника, но защитной реакции в форме отдергивания хвоста не наступало. Смерти животных от зонгорина предшествовала остановка дыхания. Результаты данной серии опытов представлены в табл. 12.
Таблица 12
Результаты опытов по изучению токсичности зонгорина на крысах (1961 г.)
Таким образом, для крыс наибольшей переносимой дозой зонгорина оказалось 5 мг/кг, а.наименьшей токсической – 10 мг/кг. Наименьшая смертельная доза препарата соответствует 20 мг/кг, LD50 – 64 мг/кг, a LD100 – 120 мг/кг.
Между тем Ф. Н. Джахангиров (1974) на мышах при пероральной даче зонгорина установил LD50 – 1575 мг/кг, диацетилзонгорина – LD50>3000 мг/кг. Такие большие расхождения в наших данных, очевидно, невозможно объяснить лишь разной степенью видовой чувствительности животных. Следует отметить, что мы пользовались не идентичными препаратами. Наш препарат оказался почти в 25 раз токсичнее. Трудно допустить, что крысы в 25 раз чувствительнее мм или сульфатные соли алкалоида в 25 раз токсичнее гидрохлоридных. Данные Ф Н. Джахангирова о токсичности зангорина очень сходны с токсичностью талатизамина, которая была установлена нами (А. А. Алдашев, 1964).
Лаппаконитин испытывался на 50 крысах. Алкалоид в дозе 5 мг/кг вызывал угнетение общего состояния животных предварительного возбуждения. Признаки отравления под влиянием лаппаконитина наблюдались при дозе 10 мг/кг и были в основном сходны с признаками отравления от аконитина. При введении 20 мг/кг лаппаконитина у части крыс (из 10) наблюдалось смертельное отравление. Алкалоид в средних дозах вызывал смерть животных обычно в течении 15—30 минут (табл. 13).
Таблица 13
Результаты опытов по изучению токсичности лаппаконитина на крысах (1961 г.)
Наибольшая переносимая доза лаппаконитина для и равна 5 мг/кг, наименьшая – 10 мг/кг, наименьшая смертельная доза 20 мг/кг, LD50 – 25 мг/кг и LD100 – 40 мг/кг.
Токсичность талатизамина в 5 опытах изучалась на крысах. При введении крысам внутрь 400 мг/кг видимых изменений в поведении животных не отмечалось. Под влиянием 800 мг/кг препарата у животных наблюдалось некоторое изменение общего состояния, появились жевательные движения, слюнотечение, животные «наводили туалет», а затем наступало угнетение продолжительностью 20—30 минут. Алкалоид в дозах 1000—1200 мг/кг у крыс вызывал дрожание и сильное потение. Однако эти признаки отравления исчезли по истечении 3—4 часов, и животные по внешнему виду отличались от контрольных только взъерошенностью шерсти. Смертельного отравления крыс не наблюдалось, даже при введении 1400 мг/кг талатизамина (табл. 14). Ввиду малой токсичности талатизамина опыты в дальнейшем были прекращены.
Таблица 14
Результаты опытов по изучению токсичности талатизамина на крысах(1961 г.)
Для изучения токсичности делаваконитина проводилось 14 опытов. Алкалоид в дозах 10—20—30—50 мг/кг не вызывал у подопытных животных заметных изменений в поведении. После введения препарата в дозах 100—150 мг/кг у крыс через 3—5 минут появлялись обильное слюнотечение, тремор и активизация движения. Животные бегали по дну ящика, грызли бумагу, щепку и другие посторонние предметы. Спустя 20—30 минут крысы успокаивались и в большей части опытов, собравшись в углу, дремали, на механическое раздражение реагировали вяло. Случаи смертельного отравления животных отмечались после дачи алкалоида в дозе 200 мг/кг. Гибель всех подопытных крыс в группе наблюдалась от дозы 550 мг/кг. После проявления вышеописанных симптомов смерть, как правило, наступала при прогрессирующем общем параличе без приступов судорог. Вначале прекращалось дыхание, а спустя 3—5 минут останавливалось сердце. В табл. 15 приводятся данные по изучению токсичности делаваконитина. В отличие от действия предыдущих препаратов под влиянием токсических доз делаваконитина гибель животных отмечалась на протяжении шести суток после дачи препарата.
В данной серии опытов для делаваконитина были установлены такие критерии деятельных доз. наибольшая переносимая – 50 мг/кг, наименьшая токсическая – 100 мг/кг, наименьшая смертельная – 200 мг/кг, LD50 – 383,8 мг/кг, LD100 – 550 мг/кг.
Таблица 15
Результаты опытов по изучению токсичности делаваконитина на крысах (1961 г.)
Из всех изучаемых аконитовых алкалоидов самым активным оказался анхвэйаконитин. В 16 опытах он был испытан на 160 крысах. Симптомы отравления животных были тождественны симптомам отравления аконитином. Однако анхвэйаконитин оказался в 5—10 раз ядовитее аконитина. Первые случаи смертельного отравления были отмечены уже при введении 0,3 мг/кг анхвэйаконитина. Незначительное повышение дозы приводило к быстрому увеличению токсического эффекта алкалоида и в дозе 1,0 мг/кг он вызывал смерть у всех 10 крыс данной группы опыта (табл. 16). В данной серии опытов наблюдается гибель животных спустя 2—6 суток после отравления алкалоидом, чего не было при отравлении аконитином, зонгорином и лаппаконитином.
Таблица 16
Результаты опытов по изучению токсичности акхвэйаконитина на крысах (1961 г.)
Обработка результатов опытов показала, что наибольшая переносимая доза анхвэйаконитина для крыс равна 0,05 мг/кг, наименьшая токсическая – 0,1 мг/кг, наименьшая смертельная – 0,3 мг/кг, LD50 – 0,66 мг/кг, LD100 – 1 мг/кг.
Подводя итоги группе опытов по изучению острой токсичности шести индивидуальных алкалоидов аконитовых растений, нами составлена сводная таблица, где алкалоиды размещены последовательно в порядке активности (табл. 17).
Таблица 17
Сравнительная токсичность аконитовых алкалоидов
Обсуждение результатов. Сопоставляя данные опытов с шестью алкалоидами, нетрудно заметить, что симптомы отравления подопытных животных под влиянием алкалоидов аконитина, лаппаконитина в основном сходные. Они характеризуются замедлением и нарушением ритма дыхания, слюнотечением, появлением икотно-рвотных актов, потерей способности координировать движения, периодическими тетаническими судорогами, прострацией между приступами и при смертельных отравлениях – асфиксией.
Эти три алкалоида при пероральном введении быстро действуют на организм, отравление протекает довольно бурно. При благоприятном исходе после отравления аконитином и лаппаконитином нормальное состояние животных восстанавливается сравнительно быстро.
Судя по характерным симптомам в патогенезе отравлении аконитином, лаппаконитином и анхвэйаконитнном, ведущее место занимает расстройство холинергнческой системы.
Из всех изученных алкалоидов отдаленными пагубными последствиями токсикоза обладают делаваконитин и анхвэйаконитин. Это, возможно, объясняется либо медленным расщеплением алкалоидов в организме и вследствие этого длительным их действием, либо необратимым ингибирован жизненно важных физико-химических процессов в нем. Однако для выяснения истинных причин указанного явления необходимы специальные исследования.
Замеченный нами факт угнетения двигательной активности крыс при малых дозах лаппаконитина заслуживает внимания исследователей для изучения этих свойств и возможности использования алкалоида в качестве седативного средства.
Зонгорин, делаваконитин и талатизамин оказались гораздо менее токсичными. Вероятно, это объясняется их принадлежностью к атизиновой группе алкалоидов.
Нами констатирована ярко выраженная индивидуальная чувствительность животных к изучаемым алкалоидам, особенно зонгорину. Например, одни крысы погибали от дозы 20 мг/кг, другие оставались живыми после введения даже 100 мг/кг этого препарата. Эта особенность, вероятно, связана с тем, что зонгорин при детальном фармакологическом изучении оказался антидепрессантом центрального действия избирательно возбуждающим адренореактивные структур ретикулярной формации среднего мозга и латеральных и заднего гипоталамуса (Ф. Н. Джахангиров, 1974).
По токсичности среди всех изученных алкалоидов первое место занимает анхвэйаконитин, последнее – талатизамин.
Большинство смертельных отравлений животных от аконитов, видимо, связано с содержанием в них сложных алкалоидов типа аконитина.
4. Испытание биологической активности суммы аконитовых алкалоидов на овцах
В предыдущих опытах мы убедились в том, что различи виды аконита и его алкалоиды обладают различной степенью токсичности для лабораторных крыс. Эти материалы послужили ориентиром при экспериментальном изучении токсикодинамики аконитов и их действующих начал на организм овец. При постановке данной серии опытов преследовалась цель выяснить активность сумм аконитовых алкалоидов двух химических групп на организм овец и испытать различные медикаменты при аконитовом отравлении животных.
Опыты проводились в производственных условиях летом (август—сентябрь) 1961 г на пастбищах Курама-Тёр и Кокуй-Бель верховья Чаткальской долины Киргизии.
Методика исследования. Испытывались суммы алкалоидов аконита джунгарского (СААД) и таласского (СААТ). Они были избраны потому, что первая, как установлено нами на лабораторных животных, относится к числу сильно ядовитых алкалоидов и содержит в своем составе аконитин, а вторая – мало активные алкалоиды атизинового типа (рисунки 7, 4, 5).
Для определения индивидуальных алкалоидов в их суммах нами применялась методика хроматографии на бумаге, которая описана у Г. К. Никонова (1959) Подвижной фазой служила система и—бутанол, насыщенная 5%-ной уксусной кислотой. В качестве свидетелей были взяты из ядовитых алкалоидов аконитин, а из мало активных – талатизамин. Суммы алкалоидов давались животным внутрь и вводились подкожно. Подопытная группа насчитывала 145 овец.
В качестве медикаментозного противоядия в случаях отравления экспериментальных животных испытывался атропин.
Перед постановкой опытов у овец изучался обычный клинический статус: общее состояние, температура, пульс, работа сердца, дыхание, аускультационные данные сердца и легких, работа рубца, состояние его стенок, степень руминации, перистальтика кишечника и другие показатели.
Результаты исследования. В первой группе опытов 20 овцам вводилась через резиновый зонд вовнутрь СААД в дозе 0,1 мг/кг в разведении 1 10000.
При постоянном шестичасовом наблюдении у подопытных животных не удалось заметить появления каких-либо признаков интоксикации. Не было изменений в их общем состоянии и в дальнейших десятидневных наблюдениях. Убедившись в нетоксичности этой дозы алкалоидов для овец, приступили к постановке следующей группы опытов.
Рис. 7 Хроматограмма аконитовых алкалоидов: 1 алкалоиды аконита киргизского, 2 талатизамин, 3 аконитин, 4 алкалоиды аконита джунгарского, 5 алкалоиды аконита таласского.
Для изучения антагонистического действия атропина при, аконитовых отравлениях была проведена вторая группа опытов на 5 овцах, которым энтерально вводилась СААД в дозе 0,5 мг/кг. Эта доза оказалась токсичной для овец. Спустя 10—15 минут у животных появилось слюнотечение, носовое истечение. Овцы стали часто облизываться. Дыхание стало глубоким, частота его незначительно замедлилась. Затем поведение овец стало беспокойным, часто мотая головой, они стремительно двигались вперед, скрежетали зубами, временами широко открывали рот, как будто зевали, при этом губы стягивались по углам, из открытого рта вытекала шнуром густая слюна. Пульс был частым и аритмичным. Появились икотно-рвотные движения. Руминация отсутствовала, стенки рубца были напряжены. В этой стадии отравления, т. е. через 40—50 минут после дачи суммы алкалоидов аконита джунгарского, всем животным подкожно вводился 0,1%-ный водный раствор сульфата атропина в дозе 1 мг/кг.
В трех случаях атропин показал явный антагонистический эффект, устранив симптомы токсикоза. После инъекции атропина через 2—5 минут животные начинали успокаиваться, прекращалось слюнотечение и икотно-рвотные движения, учащалось дыхание, исчезала аритмия пульса, оживлялась руминация, стенки рубца расслаблялись и спустя 30—45 минут после введения антидота овцы начинали пастись.
У двух овец и после введения атропина вышеописанные симптомы продолжали развиваться. К ним прибавились еще нарушение координации движений, тимпания рубца и расслабление скелетной мускулатуры. Выздоровление животных наступало в порядке, обратном развитию симптомов отравления, и спустя 8—10 часов от начала заболевания животные успокаивались, а через 10—12 часов восстанавливались жвачка и аппетит. Последующие десятидневные наблюдения показали отсутствие видимых изменений в общем состояния животных.
Третья группа опытов (на 20 клинически здоровых овцематках) предназначалась для изучения симптомов смертельного отравления препаратом СЛАД я испытания противоядной эффективности атропина.
Всем животным подкожно вводилась СААД в дозе 0,1 мг/кг. Вскоре после инъекции препарата животные начали беспокоиться, стремительно бегали, не замечая препятствий, спотыкались, падали, изо рта вытекала обильная густая слюна, появлялись икотно-рвотные движения с сильной антиперистальтикой преджелудков. Пульс не прощупывался, при аускультации отмечалась тахикардия с неправильным ритмом. Дыхание резко замедлялось, выдохи производились с трудом при участии всей скелетной мускулатуры.
Признаки асфиксии в виде посинения склеры глаз, слизистой оболочки рта и носа с каждой минутой прогрессировали. Развитие симптомов отравления шло так быстро, что через 10—15 минут после введения препарата пришлось 16 овец прирезать в агональной стадии. Только 10 овцам из 20 успели подкожно ввести атропин. Выздоровевшие 4 овцы относились к числу получавших медикаментозную помощь.
В четвертой группе опытов находилось 100 клинически здоровых трехлетних овцематок. Ставилась цель изучить стимулирующее влияние суммы алкалоидов аконита таласского (СААТ) на половую охоту у овец, так как по данным ряда авторов (Craig, 1944, Генри, 1956 и др.), аконитовые алкалоиды имеют стероидную структуру. Стероидная структура, как известно, свойственна химическому строению половых гормонов и многим другим стимуляторам полового цикла млекопитающих. Из аконитовых алкалоидов мало токсичными для животных, по нашим данным, оказались алкалоиды аконита таласского. Поэтому они представляют особый интерес для изучения в направлении ветеринарной фармакологии.
