Текст книги "Ароматерапия. Справочник"

Автор книги: В. Николаевский

сообщить о нарушении

Текущая страница: 22 (всего у книги 26 страниц)

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что РАВ эфирных масел, вызывая уменьшение частоты регистрации эндогенных факторов риска – КБА и препятствуя возникновению связанных с их появлением нарушений иммунореактивности, могут быть использованы для разработки новых нетрадиционных методов АТ повышенного профессионального онкологического риска.

Глава 22. ФИЗИОТЕРАПИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ

Природные и преформированные физические факторы должны развиваться параллельно и дополнять друг друга. В этом плане, на наш взгляд, особенно целесообразно сочетанное применение некоторых физиотерапевтических процедур с эфирными маслами.

Для изучения в экспериментах на животных распределения эфирных масел в органах и тканях, их концентрации при различных путях введения, скорость элиминации из организма, надо было пометить эфироносное растение углеродом ¹⁴С.

Способ введения ¹⁴С в вегетирующие растения лаванды настоящей и монарды дудчатой с последующей отгонкой ЭМ из цветков и соцветий состоял в следующем: растение помещали в герметическую прозрачную камеру с радиоактивной ¹⁴СО, (объем камеры – 0,4 м 3 , концентрация ¹⁴СО 2 – 1%, удельная активность составляла 100 мБк/м.куб.).

Более простой способ состоял в выдерживании базальных частей свежесрезанных растений в растворе меченной ¹⁴С сахарозы с удельной активностью 3—4 мБк/мл.

Радиоуглерод, ассимилированный из ¹⁴С сахарозы или ¹⁴СО, при фотосинтезе, включался в реакции синтеза ЭМ. Удельная активность ЭМ соответствовала 400 кБк/мл. Измерение проводилось газоразрядным детектором. Описанный способ метки с ¹⁴СО 2 применялся в исследованиях поступления и распределения ЭМ в организме животных.

При внутримышечном введении ЭМ монарды включение метки регистрировалось во всех органах: в легких – 450 имп/мин, печени, селезенке, сердце, крови – 250—300 имп/мин, в почках – 3000– 6000 имп/мин, в мышцах в месте введения – 1000—1500 имп/мин. Замеры проводили через 2 ч после введения ЭМ. Эфирное масло монарды элиминировалось через почки и легкие.

При ингаляционном введении ЭМ монарды, меченной ¹⁴С, установлено, что через 2 ч максимальное количество радиоактивной метки обнаруживалось в легких – 330 имп/мин на 100 мг сухой массы, в печени и почках – 169 и 225 имп/мин, селезенке – 73,6 (фоновый уровень 45 имп/мин). Через 6 ч метка обнаруживалась только в почках – 82 имп/мин. Через 24 ч резко возрастала радиоактивность селезенки (345 имп/мин). На 4-е сутки радиоактивность вновь повысилась в легких и почках, а в селезенке снизилась.

Фонофорез в сочетании с ЭМ. Мы изучили возможность введения ЭМ лаванды методом фонофореза. В работе использовались ЭМ лаванды, меченные ¹⁴С. Крысам опытной группы масло лаванды вводили путем фонофореза в депилированный участок кожной поверхности спины. В контрольной группе масло втиралось в аналогичном количестве стеклянной палочкой. С этой целью в опытной и контрольной группах на депилированные участки кожи наносили масло в количестве 0,4 мл. Процедуру проводили однократно в течение 20 мин. После 2-, 6-часовой и суточной экспозиции крыс обеих групп забивали. Для исследования забирались кусочки кожи из области втирания, мышцы, почки, а также кровь, из которых после тщательного высушивания и растирания готовили навески по • 70 мг. Радиоактивность проб определяли на газово-проточном счетчике. По количеству импульсов в навеске судили о количестве введенного в организм крысы ЭМ лаванды.

Замеры радиоактивности в исследуемых пробах показали, что ЭМ лаванды в большом количестве вводится с помощью ультразвука. После 2-часовой экспозиции количество импульсов в пробах крови опытной группы достоверно превышало их число в контрольных пробах (Р<0,001). После 6-часовой экспозиции достоверного различия между радиоактивностью опытных и контрольных проб не отмечалось. После суточной экспозиции в пробах кожи опытной группы радиоактивность резко снизилась, в то время как в контрольной группе она была достоверно выше (Р<0,001). Показатели радиоактивности проб почек, печени, мышц и крови статистически не обрабатывались из-за их низкой радиоактивности.

Приведенные данные позволяют заключить, что ультразвук способствует большему введению масла лаванды в кожу и быстрейшему его поступлению в кровь, чем при обычном втирании (массаже).

Введение эфирного масла лаванды методом фонофореза и массажа. Нами в эксперименте установлено, что при массаже с ЭМ лаванды, меченного ИС, оно вводится медленнее, чем при фонофорезе (Р<0,05), но в коже задерживается дольше. Так, через сутки после массажа радиоактивность кожи была достоверно выше (Р<0,001), чем при введении методом фонофореза.

Введение эфирного масла лаванды при бальнеопроцедурах. Через 2 ч после отпуска ванн крысам с водопроводной водой и эфирным маслом лаванды, меченным ¹⁴С в пропорции 99,5:0,5, при длительности процедуры 30 мин радиоактивность крови составила 158, легких – 226, почек – 173 имп/мин, что свидетельствует о высокой и быстрой проходимости ЭМ через кожу и поступлении их в кровь и органы. Это подтверждает целесообразность сочетанного использования ванн с эфирными маслами.

Действие фонофореза в сочетании с ЭМ лаванды на резистентность животных. Изучен первичный иммунный ответ крыс при действии на проекцию тимус—костный мозг фонофореза в сочетании с одновременным нанесением ЭМ лаванды.

Исследования проводили на трех группах крыс по 10 животных в каждой. Животные контрольной группы воздействию ультразвука не подвергались. В 1-й опытной группе воздействовали ультразвуком мощностью Вт/см.кв. на проекцию тимус—костный мозг; длительность процедуры 15 мин. Во 2-й группе воздействовали ультразвуком той же мощности, область и длительность воздействия были те же, что и в 1-й группе, но вместо вазелина использовали ЭМ лаванды. Во всех трех группах курс включал 10 процедур.

Исследовали функциональную активность Т-лимфоцитов, ГЗТ и титр антител. Данные, полученные в опытных группах, сравнивали с результатами исследования животных интактной группы. По функциональной активности Т-лимфоцитов, ГЗТ и титру общих антител IgM опытные группы достоверно отличались от контрольной. По титру антител достоверное различие установлено лишь в опытной группе (ультразвук в сочетании с ЭМ лаванды). При сравнении результатов 1-й и 2-й опытных групп достоверное различие выявлено по выраженности ГЗТ и титру антител класса IgG.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что при фонофорезе действие ультразвука на ГЗТ и гуморальный иммунитет было более выраженным в тех случаях, когда фонофорез сочетался с эфирным маслом.

Эфирные масла в сочетании с лечебной грязью. Преимущество действия лечебной грязи с ЭМ состоит в том, что оно усиливается за счет биологически активных веществ ЭМ. Высокая проникающая способность ЭМ через кожу позволяет считать, что при накожном их применении следует ожидать проявления общего характера. Через кожу кролика ЭМ эвкалипта, чабреца проникают за 20—40 мин; лимонное, анисовое, бергамотное ЭМ – за 40—60 мин; лаванды, сосны, герани – за 60—70 мин; кориандра – за 100 мин. ЭМ, помимо собственной активности, могут быть носителями для других лекарственных средств, которые требуется приложить локально и получить общие эффекты.

Мы установили в эксперименте, что через 2 ч после накожной аппликации крысам лечебной грязи (озеро Мойнаки, Евпатория) с ЭМ лаванды, меченной ¹⁴С в пропорции 99:1, и при длительности процедуры 30 мин радиоактивность крови составила ПО имп/мин, легких – 106, почек – 144 имп/мин.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что ЭМ при сочетанном применении с лечебной грязью проникают через кожу, поступают в кровь и разносятся по всему организму.

Действие лечебной грязи с ЭМ на гуморальный иммунитет. Опыты проводили на двух группах крыс – контрольной и опытной – по 10 животных в каждой. Использовали лечебную грязь озера Мойнаки (Евпатория) в смеси с ЭМ лаванды. Масло смешивали с лечебной грязью до 0,5% конечной концентрации. Лечебную грязь доводили до температуры 36 °С и накладывали на всю спину крысы. Длительность процедуры 15 мин, курс исследования включал 10 процедур. В контрольной группе лечебную грязь накладывали без эфирного масла. Проекция нанесения, длительность процедуры и курса соответствовали таковым в опытной группе.

Аппликация грязи в сочетании с эфирным маслом лаванды вызывала у животных достоверное (Р<0,05) повышение титра антител (IgM + IgG). Этого не наблюдали в контрольной группе животных. Таким образом, лечебная грязь в сочетании с ЭМ лаванды оказывает более выраженное действие на показатели гуморального иммунитета. Использование лечебной грязи в сочетании с ЭМ расширяет потенциальные лечебные свойства грязи.

Действие эфирного масла при нанесении на кожу проекции вилочковой железы. Мы изучали действие эфирного масла лаванды на первичный и вторичный иммунные ответы крыс при нанесении на кожу проекции вилочковой железы. Исследования проводили на двух группах животных по 10 крыс в каждой. Во время опыта крыс фиксировали и на кожу, с которой предварительно была удалена шерсть, наносили одну каплю 50% эфирного масла лаванды. Воздействие продолжалось 15 мин. Затем масло снимали сухой ватой. Курс исследования включал 10 процедур.

При первичном и вторичном ответах в опытной группе наблюдали достоверное снижение реакции ГЗТ и повышение функциональной активности Т-лимфоцитов. Одновременно отмечалось повышение титра антител иммуноглобулинов классов М + G. Приведенные данные интересны, на наш взгляд, тем, что описанный метод иммунокоррекции весьма активен и прост. Однако необходимо его дальнейшее изучение.

Можно с уверенностью предполагать позитивный эффект сочетанного действия ЭМ и лазерного излучения.

Считают возможным получать эффект от сочетанного действия биоконденсатов с электрофорезом и с внутриорганным (внутритканевым) электрофорезом. Однако эти предположения необходимо подтвердить в эксперименте.

Эффективность применения ЭМ при различных заболеваниях легких бактериальной этиологии во многом может быть повышена при сочетании их с лекарственными ферромагнетиками. Их удержание в зоне поражения с помощью магнитного поля обеспечивает создание высоких концентраций ЭМ и пролонгирует период их элиминации из организма.

Мы описали лишь некоторые стороны возможного практического применения ЭМ при СКЛ. Однако по мере получения новых экспериментальных и клинических данных сфера сочетанного применения ЭМ будет все более расширяться.

В последнее десятилетие значительно возрос интерес к нефармакологическим методам лечения, что потребовало от врачей санаторно-курортных учреждений и санаториев-профилакториев знаний ароматерапии. Это залог успеха в профилактике и лечении многих заболеваний. К ЭМ возрос интерес и у больных.

Противовоспалительная активность эфирных масел. Мы изучали на двух моделях противовоспалительную активность 23 различных видов эфирных масел.

Первая модель – модель асептического воспаления. Механизм изучения противовоспалительных средств основан на том, что в норме введение стрихнина вызывает гибель животного. Однако при моделировании у животных воспалительной реакции в области введения скипидара возникает воспалительный вал, который ограничивает очаг некроза и препятствует всасыванию в кровь из этого очага некроза токсичных веществ, находящихся в зоне воспаления. Следовательно, если в такой участок некроза ввести безусловно смертельную дозу стрихнина, животное не погибает, поскольку воспалительный вал предотвратит поступление стрихнина в кровь. Если же применяется противовоспалительное средство, интенсивность воспалительного процесса снижается, защитная функция воспалительного вала уменьшается и стрихнин из очага поражения начинает активно поступать в кровь.

Таким образом, в экспериментах регистрируется обратная зависимость: чем эффективнее противовоспалительное действие испытуемого препарата, тем менее выраженным становится противовоспалительный барьер и увеличивается выход стрихнина в кровь, причем большой процент животных погибают.

Наиболее активным по отношению к асептическому воспалению оказалось ЭМ лаванды, затем по убыванию противовоспалительной активности идут такие ЭМ, как тяжелое хвойное, ажгон, лавр, монарда, базилик и т.д.

Во второй серии опытов противовоспалительное действие ЭМ испытывали на модели инфекционного воспаления, создаваемого путем введения в лапку мыши взвеси культуры патогенного стафилококка. Наиболее эффективными были ЭМ монарды и лаванды. У монарды проявились не только противовоспалительная активность, но и выраженные антимикробные свойства.

В экспериментах на кроликах под влиянием ЭМ лаванды на 30-е сутки и особенно через 60 сут после индукции воспаления в легких регистрировалось торможение воспалительного процесса. В аналогичной контрольной группе к этому сроку воспалительный процесс прогрессировал до гнойно-некротического. Под влиянием ЭМ базилика у части животных наблюдались выраженное торможение воспалительных процессов и активация пролиферативных процессов в легких, направленных на организацию гнойных очагов воспаления.

При лечении инфицированных ран, ожогов, местных гнойных процессов еще недавно акцент ставили на антибактериальную терапию. Однако этот взгляд на современном этапе изменился в сторону методов усиления иммунной защиты организма. Оказалось, что некоторые ЭМ способны корригировать нарушения иммунной системы, вызванные длительным воспалением. Так, через 30 и 60 сут после создания воспаления в легких базилик значительно стимулировал функциональную активность Т-лимфоцитов и реакции ГЗТ. В контрольной группе животных в данные сроки воспаления интенсивность этих реакций была ниже уровня интактных животных.

Итак, ЭМ обладают выраженным противовоспалительным эффектом. Механизм этого действия сложный. Он обусловлен многосторонним влиянием на различные стороны воспалительного процесса. Так, угнетение пусковых механизмов воспаления на этапе повреждения биологических мембран может осуществляться за счет стабилизации мембран, ингибирования свободнорадикального окисления, действия на кору надпочечников, стимулирующих продукцию противовоспалительных стероидных гормонов, способности тормозить инактивацию адреналина, обладающего противовоспалительными свойствами, действовать антагонистически на медиаторы воспаления (гистамин, серотонин, кинины). Важную роль в противовоспалительном эффекте играют также состояние неспецифической резистентности организма и его иммунологическая реактивность.

Глава 23. ЭФИРНЫЕ МАСЛА И ВАКЦИНАЦИЯ

Профилактические прививки – высокоэффективное оружие в борьбе с инфекционными болезнями. Профилактические прививки npоводят в целях получения активного и пассивного иммунитета [Терешин Б.Б., Сохин А.А., 1981]. Для создания активного иммунитет та в организм человека вводят вакцины или анатоксины. Благодагоря вакцинации резко сокращены или практически ликвидированы такие инфекционные заболевания, как дифтерия, натуральная оспа, полиомиелит. Успехи вакцинопрофилактических мероприятий очевидны. Отдельные страны отказались от обязательных прививок против некоторых инфекций. Однако это решение было преждевременным. В 90-е годы вновь повысилась заболеваемость дифтерией, туберкулезом и другими инфекционными болезнями. Особое внимание обращает на себя тот факт, что основная масса прививок приходится на время между ранним детством и юношеством, когда организм еще не сформировался. Не сформировалась и иммунологическая система, которая при достаточно сжатом прививочном календаре получает чрезмерную иммунологическую нагрузку.

Некоторые вакцины наряду с формированием иммунитета против инфекции иногда вызывают побочные эффекты. Возможное аллергизирующее действие прививок впоследствии может способствовать неблагоприятному течению различных заболеваний. Прививки могут оказывать отрицательное действие на неспецифическую резистентность организма и его иммунологическую реактивность (развитие вторичных иммунодефицитов). В этот период организм обычно находится в состоянии нарушенного равновесия.

Проблема профилактики прививок предусматривает дальнейшее совершенствование методов вакцинации и, в частности, поиск новых адъювантов (стимуляторов). Разработано несколько приемов стимуляции иммунного ответа, которые основаны на использовании группы адъювантов, веществ, неспецифически усиливающих функцию иммунной системы: БЦЖ, противотуберкулезная вакцина и ФГА (растительный белок фитоагглютинин) и др.

Представляют интерес результаты исследования стимуляции иммуногенеза неспецифическими, неантигенными веществами – растительными ароматическими биорегуляторами.

Нами была изучена активность РАВ монарды и базилика в условиях целостного организма. Ранее мы установили, что эти ЭМ проявляли в отношении микоплазмы FH и L-форм стрептококка 406 наиболее высокую активность и обладали иммуностимулирующей активностью [Николаевский В.В. и др., 1996]. Бактерицидная доза этих масел не превышала 100 мкг/мл.

Эксперименты проводили на 60 бройлерах-6 в возрасте 65 дней; средняя живая масса 1000 г. Они были инфицированы микоплазмой галлисептикум. В работе использована вирус-вакцина против инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ). Инфицирование птиц проводили вирусным штаммом Г-вируса ИЛТ.

В качестве РАВ использовали ЭМ монарды и базилика, показавших в экспериментах in vivo наиболее выраженные противомико-плазменные и антивирусные свойства. Кроме того, РАВ монарды действовал еще и как иммуностимулятор.

Схема постановки опыта была следующей. Всех птиц разделили на 3 группы: птицам 1-й группы (20 голов), инфицированным микоплазмой галлисептикум, вводили аэрозольной вакцинацией штамм ВНИИБП в дозе 5 ЭИД/1 м 3 атмосферы совместно с РАВ базилика в дозе 50 мг/м.куб.; птицам 2-й группы (20 голов), также инфицированным микоплазмой галлисептикум, вводили аэрозольно вакцинный штамм ВНИИБП в дозе 5 ЭИД/м.куб. совместно с РАВ монарды в дозе 50 мг/м.куб. Птицам 3-й группы (20 голов) проводили аналогичную вакцинацию, однако РАВ не использовали; эта группа была контрольной. Аэрозоль вакцинного штамма вируса ИЛТ получали с помощью генератора аэрозолей САГ-1. Через 20 дней после введения вакцины с РАВ проверяли напряженность иммунитета вирулентным штаммом Г-вируса ИЛТ. Вирулентный штамм Г-вируса ИЛТ вводили интратрахеально в дозе 1000 ЭИД (0,2 мл).

Сыворотки исследовали в реакции задержки гемагглютинации с вирусом ИЛТ и в реакции агглютинации со стандартным антигеном микоплазмы галлисептикум.

Исследования показали, что в подопытных группах, где было использовано РАВ монарды, 83,3% птиц оказались устойчивыми к действию инфекции (Р<0,001). В группе, где использовалось РАВ базилика, этот процент был ниже – 61,1%. У птиц контрольной группы устойчивость к заражению регистрировалась только в 33,3% случаев.

В группах птиц, у которых использовались РАВ, выраженность воспалительного процесса была ниже, чем в контрольной группе. Так, в группе с применением РАВ монарды на 6-й день наблюдения легкое течение ларинготрахеита отмечено у 5,6%, среднее – у 11,1% птиц. Тяжелых проявлений болезни не обнаружено. Во 2-й группе легкое течение регистрировалось в 27,8% случаев, среднее – в 5,6%, тяжелое – в 5,6%. В контрольной группе легкое течение болезни отмечено у 11,1%, среднее – у 16,7%, тяжелое – у 33,3% птиц.

Исследование реакции задержки гемагглютинации с антигеном вируса ИЛТ показало, что в группе птиц, где использовались РАВ монарды и базилика, процент положительных реакций через 6 сут колебался от 88,24 до 100. Среднегеометрический титр антител к антигену вируса ИЛТ варьировал в пределах 1,4844—1,9939. В контрольной группе эти показатели составили 81,25—87,5 и 1,4145– 1,6292% соответственно. Полученные данные свидетельствуют о том, что напряженность иммунитета к вирусу ИЛТ была выше в тех группах, где использовались РАВ.

Серологические исследования микоплазменной инфекции показали, что микоплазмоз регистрировался в 66,17—100% случаев.

При клиническом обследовании птиц было установлено, что заболеваемость у них регистрировалась в меньшем проценте случаев и протекала более благоприятно при использовании РАВ.

Таким образом, использование РАВ монарды и базилика благоприятно влияет на течение заболеваний, вызванных вирусно-микоплазменной инфекцией. РАВ существенно повышают резистентность микроорганизма к действию инфекционного агента, улучшают клиническое течение заболевания, повышают напряженность иммунитета к вирусам и микоплазмам.

Второй этап исследований был посвящен испытанию действия наиболее эффективного РАВ – монарды на напряженность иммунитета у аэрозольно вакцинированной птицы против ИЛТ, определению наиболее оптимальной дозы РАВ и испытанию сочетанного действия РАВ монарды и биологических проводников на устойчивость у привитой птицы. Для решения этих задач была проведена серия экспериментов.

В первый опыт было включено 40 голов бройлеров. Для вакцинации применяли вирус-вакцину. В опыте использовали РАВ монарды, биологический проводник – диметилсульфоксид ТУ-6-09-38 18-77. Разрешающая доза вируса – вирулентный штамм Г-вируса ИЛТ, доза 2500 ЭИД/м.куб.

Процент устойчивости птиц при вакцинировании против ИЛТ совместно с РАВ монарды был более высоким против инфекционного агента, чем использование вакцины в чистом виде, т.е. без добавок биологически активных веществ (60%).

В этом опыте было установлено, что при сочетанном воздействии диметилсульфоксида с РАВ монарды устойчивость птиц составила 30%, т.е. сочетанное воздействие биологических проводников и РАВ в данной аранжировке опыта недостаточно перспективно.

Следующие исследования были направлены на определение оптимальной дозы РАВ монарды при аэрозольной иммунизации птиц против ИЛТ. В опыт было включено 60 голов бройлеров. Для вакцинации использовали вирус-вакцину.

Разрешающая доза вируса – вирулентный штамм Г-вируса ИЛТ, доза 2500 ЭИД/м.куб.

Во втором опыте также использовали РАВ монарды. Наиболее оптимальными дозами были 50 и 100 мг/м.куб. атмосферы. Здесь процент устойчивых птиц к действию вируса ИЛТ достигал 78 и 80% соответственно. Концентрация РАВ 25 мг/м.куб. также дала хорошие результаты. Однако число резистентных бройлеров при этих дозах было ниже (75%), чем в экспериментах с дозами 50 и 100 мг/м.куб.

При использовании РАВ монарды в концентрации 150 мг/м.куб. отмечены наиболее низкие показатели устойчивости птиц к инфекционному агенту. Здесь число резистентных бройлеров составило всего 66,6%.

В экспериментах in vivo на модели вирусно-микоплазменного заражения показано, что под действием РАВ заболеваемость значительно снималась и протекала клинически более благоприятно, чем в контроле. Одновременно резистентность кур к инфицированию персистирующими микроорганизмами (микоплазмой галлисептикум и вирусом ИЛТ) повышалась. Это происходило не только за счет прямого действия РАВ на микроорганизмы, но и в результате стимуляции иммунного ответа. В пользу последнего свидетельствуют факты о том, что эффективность вакцинации резко возрастает при сочетанном использовании ее с РАВ.

В лабораторных условиях проведены опыты по изучению гисто-морфологических реакций в легких, трахее, селезенке, печени, фабрициевой сумке и вилочковой железе от 48 бройлеров 60—100-дневного возраста через 3, 7, 10, 20 и 30 дней после аэрозольной вакцинации против ИЛТ при одновременном введении РАВ.

До введения РАВ базилика на фоне гиповитаминозов и кокцидиоза отмечено значительное снижение показателей общей резистентности и морфофункционального состояния иммунокомпетентных органов. У 86% использованных в опыте цыплят имелись гистологические проявления иммуносупрессии, причем у 40% бройлеров подавление функции иммунитета было весьма значительным (иммуносупрессия IV—V степени).

После однократной обработки цыплят с выраженными проявлениями иммуносупрессии первые 3 дня наблюдались слабые признаки активации фабрициевой сумки. Уменьшилось количество фолликулов с признаками иммуносупрессии. Через 8 дней после обработки аэрозолем масла базилика количество цыплят, у которых гистологически определялось состояние иммуносупрессии фабрициевой сумки, сокращалось с 86 до 25%. В фолликулах увеличивалось число лимфоцитов и бластов.

Наиболее четко признаки иммуностимуляции проявлялись на 14-й день опыта. Размеры фолликулов имели примерно в 2 раза большую величину, чем в контроле. Происходило дальнейшее улучшение заполнения коркового вещества фолликулов лимфоцитами. Корковое вещество было представлено 7,34 рядами клеток (Р<0,001). Отмечено достоверное увеличение ширины коркового слоя вилочковой железы.

Как показали исследования, стимулирующее действие аэрозоля масла базилика проявляется лишь при использовании 50 мг/м.куб. не более чем в двукратной повторяемости с интервалом 1 день.

При гистологическом изучении состояния фабрициевой сумки и вилочковой железы у цыплят до вакцинации и у части контрольных птиц, не подвергавшихся вакцинации, выявлены изменения, свидетельствующие о наличии у них иммуносупрессивного состояния.

У цыплят, иммунизированных вакциной с добавлением 50 и 75 мг/м.куб. масла базилика, уже на 3-й день после обработки отмечалась активация лимфоидных структур фабрициевой сумки. На 8-й день были очень четко выражены различия между группами, получавшими и не получавшими масло базилика в составе аэрозоля с вакциной. У цыплят, которым вводили масло базилика, показатели морфофункционального состояния фолликулов фабрициевой сумки были примерно на 25% выше, чем у цыплят контрольной группы.

Более сильная реакция с активацией 75—100% фолликулов наблюдалась в фабрициевой сумке уже на 3-й день после введения вакцины с добавлением 75 мг/м.куб. масла базилика. Признаки четкой активации фолликулов фабрициевой сумки после введения одной вакцины регистрировались лишь на 14-й день.

Добавление масла базилика в состав вакцины из расчета 50 и особенно 75 мг/м.куб. благоприятно отражалось на морфологическом состоянии слизистой оболочки респираторного тракта и легких. При этом ослаблялись проявления десквамативного катара и гиперсекреции, которые развивались при введении цыплятам одной вакцины.

Глава 24. МЕТОДЫ КОНСЕРВАЦИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ

В 1963 г. в окрестностях Рима был обнаружен саркофаг с телом молодой девушки, погребенной около 1800 лет назад. Когда саркофаг вскрыли, присутствующие были поражены хорошо сохранившимися мягкими тканями, бровями, ресницами, волосами, заплетенными в косу. От мумии исходил аромат. Впоследствии выяснилось, что одним из основных компонентов бальзамического состава, обладающего большой бактерицидной активностью, был эвкалипт.

Консервирующее действие бальзамических веществ на ткани умерших в течение тысячелетий поражало современников своей эффективностью.

В наше время появились новые задачи, связанные с проблемой консервации клеток крови и тканей различных органов, продуктов жизнедеятельности человека, пищевых продуктов, воды и т.д.

Консервация крови. Консервация клеток крови и тканей человека стала в нашем столетии актуальной проблемой биологии и медицины. Большое значение придается изысканию консервантов, обеспечивающих морфологическую и функциональную целость клеток после длительного консервирования.

Проблема консервирования крови и ее клеточных компонентов развивается в последние десятилетия в двух направлениях: усовершествование методов консервирования при положительных температурах (+4 °С) и разработка методов хранения клеток в замороженном состоянии. В первом направлении доминирует концепция возможно более длительного поддержания метаболизма в клетках, во втором – временной остановки обменных процессов, т.е. сохранения живых клеток в состоянии обратимого анабиоза.

Разработаны теоретические основы консервирования крови, которые способствовали созданию эффективных консервирующих растворов, позволяющих сохранять кровь при 4 °С до 3 нед в физиологически полноценном состоянии. Однако и в улучшенных консервантах уже к концу 3-й недели хранения крови при 4 °С эритроциты становятся метаболически неполноценными. В связи с этим продолжаются изыскания путей дальнейшего улучшения метаболического статуса эритроцитов при их хранении.

При всех известных методах консервирования неизбежно происходит потеря определенного количества ядросодержащих, в том числе живых, клеток.

Поиск дальнейших путей повышения эффективности методов консервации при положительных температурах предопределил интерес к изучению возможностей индуцирования наилучших для консервации условий взаимодействия клеток со средой, повышения резистентности и пр.

Литературные данные свидетельствуют, что решению этих вопросов в значительной мере может способствовать использование для консервации биологически активных веществ и ряда физических факторов. Клетки периферической крови, отличавшиеся друг от друга не только по морфологическим особенностям, но и по типу обмена, в условиях консервирования обладают различной устойчивостью к физико-химическим воздействиям окружающей среды.

Особое значение приобретает исследование мембран клеток при их консервировании. Именно плазматическая мембрана клетки играет роль биологического барьера, обусловливающего проницаемость для различных веществ и воды. Мембрана ответственна за проникновение в клетку субстратов питания из плазмы и консервирующих растворов и за выделение из клеток продуктов распада, образующихся в процессе обмена веществ. Для этого на клетки воздействуют поверхностно-активными веществами, мембранотропными агентами, взаимодействующими с липидами мембран, антиоксидантами и др.

Серия исследований, проведенных в нашей лаборатории по изучению биологического действия ЭМ на клетки, убедила нас, что разработка консервантов клеток на основе ЭМ перспективна. Такие свойства некоторых ЭМ, как высокая бактерицидная антиоксидантная активность, способность стабилизировать клеточные мембраны, повышать митотическую активность клеток, влиять на репарацию ДНК, на ферментные и обменные процессы клеток, К—Na-ионные каналы, позволили предположить возможность использования ЭМ в качестве консервантов клеток.

Первые серии экспериментов показали с достаточной степенью достоверности (0,05>Р>0,0001), что ЭМ шалфея, кориандра, базилика, непеты, полыни, эвкалипта, бархатцев в количестве 2,5∙10^-5 мг/мл могут повышать число жизнеспособных клеток в культуре на 10– 20% по отношению к контролю. В дальнейшем было выявлено, что аналогичным действием обладают большинство из исследованных масел. Разведение 2,5∙10⁵ —2,5∙10^-8 мг/мл способствовало увеличению числа жизнеспособных клеток. Более низкие концентрации эфирных масел не оказывали влияния на клетки, более высокие (2,5∙10^-1) подавляли рост культур (табл. 22).